SARS-CoV-2- & Influenza A/B-PCR

SARS-CoV-2- & Influenza A/B-PCR

Themenübersicht

Allgemeines

  • Bei der SARS-CoV-2 & Influenza A/B-PCR (Polymerase-Kettenreaktion) handelt es sich um einen automatisierten Echtzeit-RT-PCR-Multiplex-Test für den qualitativen In-vitro-Nachweis und die gleichzeitige Differenzierung von SARS-CoV-2-, Influenza-A- und Influenza-B-Virus-RNA in von medizinischem Fachpersonal entnommenen Nasopharyngeal- und Nasalabstrichen und in vom Patienten selbst (vor Ort und unter Anleitung einer qualifizierten Fachkraft) entnommenen Nasalabstrichen von Patienten mit Anzeichen einer viralen Atemwegsinfektion mit COVID-19-typischen Symptomen durch eine medizinische Einrichtung.

Indikation

Differenzialdiagnose von COVID-19 und Influenza

Material

Universalabstrich

  • Nasalen und nasopharyngeale Abstriche:
    • in UTM
    • in VTM
    • in trockenen Tupfern (z. B. Dacron, Nylon oder Viskose) in 0.9%iger Kochsalzlösung
Stabilität
2-25 °C
24-48 Stunden
2-8 °C
3 Tage
-70°C
länger

Durchführung

Durchführungsort/-orte:

MZLA - Standort Altenburg
Durchführungsfrequenz
werktags
jederzeit
an anderen Tagen
jederzeit

Referenzbereich

negativ

Beurteilung der Ergebnisse

Meldepflicht:

Bei positivem Nachweis erfolgt eine namentliche Meldung an das Gesundheitsamt, sofern der direkte oder indirekte Nachweis auf eine akute Infektion hinweist.

  • Sowohl der direkte Nachweis von SARS-CoV-2 als auch der von Influenza A/B ist namentlich meldepflichtig.

Testprinzipien:

  • Zielsequenz:
    • SARS-CoV-2: im ORF1 a/b- und im E-Gen
    • Influenza A: in der hoch konservierten Region der Matrixgene 1 und 2 (M1/M2)
    • Influenza B: in der hoch konservierten Region des Nuklearexportprotein (NEP)/Nicht-Strukturprotein-Gen 1 (NS1)

Analytische Sensitivität:

  • Nachweisgrenze (Trefferquote von 95%):
    • SARS-CoV-2
      • 0.012 TCID50/ml
      • 12 Kopien/ml
    • Influenza A
      • H3N2
        • 0.050-0.12 TCID50/ml
      • H1N1
        • 0.020-0.12 0.025 TCID50/ml
      • B (Yamagata-Linie)
        • 0.011-0.019 TCID50/ml
      • B (Victoria-Linie)
        • 0.019-0.032 TCID50/ml

 

Grenzen des Verfahrens

  • Negative Ergebnisse schließen, wie bei anderen Tests auch, eine SARS-CoV-2-, Influenza A- oder Influenza B-Virus-infektion nicht aus und dürfen nicht als alleinige Grundlage für die Behandlung oder andere Entscheidungen bezüglich der Versorgung des Patienten herangezogen werden.
  • Falsch-negative Ergebnisse können auftreten, wenn eine Probe nicht fachgerecht entnommen, transportiert oder gehandhabt wird, wenn zu wenig nachweisbare RNA vorhanden ist oder wenn mindestens ein Zielvirus die Amplifikation anderer Zielsequenzen hemmt.
  • Es kann zu ungültigen Ergebnissen kommen, wenn zu wenig Probe vorhanden ist oder die Probe hemmende Substanzen enthält, die die Isolierung und/oder Amplifikation und Detektion der Ziel-Nukleinsäuren verhindern.
  • Mutationen in den Zielregionen, die durch den SARS-CoV-2 & Influenza A/B-Test abgedeckt werden, können die Primer- und/oder Sondenbindung beeinträchtigen und dadurch zur Nichterkennung des Virus führen.

Literatur

  • Herstellerangaben
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